> Știri > Știri din industrie

Care sunt funcțiile trusei ELISA?

2022-12-23

Kitul ELISA se bazează pe fază solidă a antigenului sau anticorpului și etichetarea cu enzimă a antigenului sau anticorpului. Antigenul sau anticorpul legat de suprafața purtătorului solid își păstrează încă activitatea imunologică, iar antigenul sau anticorpul marcat cu enzimă își păstrează atât activitatea imunologică, cât și activitatea enzimatică. În momentul determinării, proba supusă testului (în care se măsoară anticorpul sau antigenul) reacționează cu antigenul sau anticorpul de pe suprafața purtătorului solid. Complexul antigen-anticorp format pe purtătorul solid este separat de alte substanțe din lichid prin spălare.

Se adaugă antigeni sau anticorpi marcați cu enzime, care se leagă și la purtătorul solid prin reacție. În acest moment, cantitatea de enzimă din faza solidă este proporțională cu cantitatea de substanță din eșantion. După adăugarea substratului reacției enzimatice, substratul este catalizat de enzimă pentru a deveni produse colorate. Cantitatea de produs este direct legată de cantitatea de substanță testată din eșantion, astfel încât analiza calitativă sau cantitativă poate fi efectuată în funcție de adâncimea culorii.

Eficiența catalitică ridicată a enzimelor amplifică indirect rezultatele răspunsului imun, făcând testul extrem de sensibil. ELISA poate fi utilizat pentru determinarea antigenelor, dar poate fi folosit și pentru determinarea anticorpilor.

Principiile de bază ale trusei ELISA
Utilizează reacția specifică a antigenului și a anticorpului pentru a conecta obiectul la enzimă și apoi produce o reacție de culoare între enzimă și substrat pentru determinarea cantitativă. Obiectul de măsurare poate fi anticorpul sau antigenul.

Există trei reactivi necesari în această metodă de determinare:
â Antigen sau anticorp în fază solidă (adsorbant imun)
â¡ Antigen sau anticorp marcat cu enzime (marker)
â¢ substrat pentru acțiunea enzimelor (agent de dezvoltare a culorii)

În măsurare, antigenul (anticorpul) este mai întâi legat de purtătorul solid, dar încă își păstrează activitatea imună, apoi se adaugă un conjugat (marker) de anticorp (antigen) și enzimă, care își păstrează încă activitatea imună și enzima inițială. activitate. Când conjugatul reacţionează cu antigenul (anticorpul) de pe purtătorul solid, se adaugă substratul corespunzător al enzimei. Adică hidroliza catalitică sau reacția REDOX și culoarea.

Nuanța de culoare pe care o produce este proporțională cu cantitatea de antigen (anticorp) care trebuie măsurată. Acest produs colorat poate fi observat cu ochiul liber, microscop optic, microscop electronic, poate fi măsurat și cu spectrofotometru (instrument de etichetare a enzimelor). Metoda este simplă, convenabilă, rapidă și specifică.

Anterior:Cotaus te asteapta la 2023EBC!

Următorul:De ce cultura celulară lizează mai întâi celulele roșii din sânge?